諾博萊德  Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM

Fluo-4，AM 鈣熒光探針   細(xì)胞功能檢測(cè)

產(chǎn)品貨號(hào)：F6388

產(chǎn)品名稱：Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM

英文名稱：Fluo-4，AM

產(chǎn)品規(guī)格：100ug/1mg/10*100ug

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

別名：鈣熒光探針Fluo-4, AM

分子式：C₅₁H₅₀F₂N₂O₂₃

分子量：1096.94

外觀(性狀)：凍干粉（橙紅色）

激發(fā)波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)(Ex/Em)：494/516

儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，有效期1年。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderF6388 Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM是一種將Fluo-3 結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強(qiáng)的F，它的最大激發(fā)波長(zhǎng)會(huì)向短波長(zhǎng)處偏離10nm左右。這個(gè)波長(zhǎng)更接近于氬激光器的波長(zhǎng)，所以用氬激光器激發(fā)時(shí)，F(xiàn)luo-4的熒光強(qiáng)度比Fluo-3強(qiáng)一倍。

Fluo-4, AM 穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)，F(xiàn)luo-4若以游離配體形式存在時(shí)幾乎是非熒光性的，但是當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，最大激發(fā)波長(zhǎng)為494nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為516nm。可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

操作說明：（forHumanTcells）

1，試劑

2 mM 的Fluo-4,AM/DMSO （將1mgFluo-4,AM 溶于442µLDMSO ）

Pluronic F127

Hanks balanced salt solution（HBSS）：建議使用不含鈣鎂、不含酚紅的HBSS

HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mMNaCl，5mMKCl， 1mMCaCl2， 0.5mMMgCl2，5mMGlucose，0.1%BSA，pH7.4 ）

2，操作

（1）向Fluo-4,AM/DMSO 溶液中加入16.5mgPluronicF127，Pluronic F127 可以防止 Fluo-4,AM 在 HBSS 中聚合并能幫助其進(jìn)入細(xì)胞。

（2）用HBSS 稀釋Fluo-4,AM 溶液，制備4µM 的Fluo-4,AM 工作液。

（3）將Fluo-4,AM 工作液加入細(xì)胞，在37℃培養(yǎng)20分鐘。

（4）加入5 倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。

（5）用HEPES buffersaline 洗滌細(xì)胞 3 次，然后用HEPESbuffersaline 使細(xì)胞重懸浮，制成1×105cells/mL 的溶液。

（6）37 ℃下培養(yǎng)10分鐘，然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光鈣離子檢測(cè)。激發(fā)波長(zhǎng)494nm，發(fā)射波長(zhǎng)516nm 。

注意：標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先確定最佳條件。以上方法僅供參考。

Fluo-4，AM 鈣熒光探針   細(xì)胞功能檢測(cè)

產(chǎn)品訂購(gòu)信息

F6388 Fluo-4，AM 鈣熒光探針Fluo-4，AM  100ug/1mg/10*100ug